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产品中心 PRODUCT


胶回收纯化试剂盒
    发布时间: 2017-08-18 14:59    

规格

组分

试用装- 6

mini离心柱

6

1.5ml离心管

6

溶液B1

1.6 ml/×1

溶液WB

8 ml/×1

溶液TE

1.6ml/×1

说明书

1

 

² 产品介绍

本产品用于琼脂糖凝胶中DNA片段的回收以及PCR反应、RFLP、磷酸化、标记反应等其他酶促反应中DNA片段的纯化以及DNA溶液的浓缩。产品采用特殊的缓冲液系统和固相DNA亲和介质,具有快速、高效和大容量等特点(离心柱的最大DNA结合容量超过40 µg,纯化100 bp~40 kbDNA片段的回收率超过90%)。测试表明,提取得到的DNA纯度和得率,以及在PCR程序和内切酶反应中的效率超过某些著名品牌产品。

 

² 存储和稳定性

试剂盒储存在环境温度-40~40,相对湿度不大于75%,无腐蚀性气体的避光处。

保质期36个月。

 

² 使用前准备  

阅读说明书,熟悉操作步骤并备好所需试剂及相关材料。

· 用户自备仪器及材料:台式小型离心机, 1.5 ml离心管, 55~ 60℃水浴锅,无水乙醇。

· 盒中所含的1.5ml离心管专用于步骤6收集DNA溶液。

 

² 操作步骤

1. 琼脂糖凝胶:用干净的手术刀片将含DNA片段的凝胶切下,放入1.5ml离心管(自备)中,称重(100 mg的凝胶切片约等于100 µl的体积)。向管中加入凝胶等体积的溶液B155~60℃加热8~10 min至凝胶完全融化(每隔2min震荡混匀溶液一次)。冷却至室温,至步骤“2”。

PCR产物纯化、浓缩:PCR反应液中加入等体积的溶液B1,充分混匀,至步骤“2”。

2. 将液体全部移套有收集管的mini离心柱中(注:单次转入离心柱的溶液量应650μl,否则需分多次转入并离心),最高转速12000 g 13000 rpm 以上)离心 1 min。取出离心柱,弃去收集管中废液,将离心柱放回收集管

3. 离心柱中加入500μl 溶液WB最高转速12000 g 13000 rpm 以上)离心 30 sec。取出离心柱,弃去收集管中废液,将离心柱放回。

4. 重复步骤3”一次。

5. 最高转速12000 g 13000 rpm 以上)离心 2 min

6. 将离心柱取出并放入新的1.5ml离心管中向柱中加入溶液TE 150- 200 μl静置 2 ~ 3 min后,最高转速12000 g 13000 rpm 以上)离心 1 minDNA溶液即被收集在1.5 ml离心管中。

注:将溶液TE热至50~60使用,高洗脱效率


² 常见问题解答

问题

可能的原因

建议

DNA

得率低

未添加足量的溶液B1

根据指示正确计算溶液B1的添加量

琼脂糖凝胶尚未完全融化

确保水浴锅的温度已经调至55~60℃,以确保凝胶完全溶解。如有必要,可适当增加缓冲液B1的用量

琼脂糖凝胶电泳缓冲液不新鲜

过度使用的TAETBE电泳缓冲液会导致PH升高,从而降低DNA结合到基质上的能力。请使用新鲜的电泳缓冲液。

 

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